时装设计师林惠民（林子祥 饰）获邀前往美国做一场时装展，他同时亦邀请了此前合作无间的模特徐竺筠（张天爱 饰）参加时装展。出身中国的他想在时装展上加入中国的元素，于是决定加入广东手托木偶这一概念。在一次制作木偶时，林惠民忽然被木偶击昏，恍惚间，他看到了一起26年前的谋杀案。由于这一事件过于诡异，赞助商施继豪（谢贤 饰）要求林惠民停止制作木偶以免再生意外。但林惠民没有答应，继续赶做木偶。几乎一模一样的情形下，林惠民再次被木偶击昏，这一次，他清楚看到了26年前的秘密。

时装设计师林惠民（林子祥 饰）获邀前往美国做一场时装展，他同时亦邀请了此前合作无间的模特徐竺筠（张天爱 饰）参加时装展。出身中国的他想在时装展上加入中国的元素，于是决定加入广东手托木偶这一概念。在一次制作木偶时，林惠民忽然被木偶击昏，恍惚间，他看到了一起26年前的谋杀案。由于这一事件过于诡异，赞助商施继豪（谢贤 饰）要求林惠民停止制作木偶以免再生意外。但林惠民没有答应，继续赶做木偶。几乎一模一样的情形下，林惠民再次被木偶击昏，这一次，他清楚看到了26年前的秘密。

故事一：歌星Sunny（黄耀明 饰）在医院昏迷半年了，但他的身体状况良好，昏迷原因不明。护士（叶玉卿 饰）负责在凌晨值班照顾他。每天凌晨1点，护士都能看到Sunny与一名女孩在一起，原来Sunny被这个死去的歌迷缠住了…… 　　故事二：芳（袁咏仪 饰）与几名同学到学校附近探险，据说那里常有个大辫子女鬼出现。芳的同学本来是想扮鬼吓她，竟没想到她们真的遇上了这名大辫子女鬼…… 　　故事三：众多市民都在一本报刊中，看到了一位多天前被撞死的老婆婆的身影。这是一张快照，负责这些照片的是交通警员阿辉（陈小春 饰）与阿明（徐锦江 饰），令人心寒的是接下来的几个月，他们都被老婆婆的鬼魂缠绕……

积（陈奕迅 饰）和清（谷祖琳 饰）搬进了一间新房，开始了甜蜜的二人世界。他们感情很好，清是中学老师，而积则撰写色情光盘的简介。新屋入住的第一个深夜，积就在外面遇上了车祸。他昏迷过去，之后的一切，都因为这场车祸彻底的改变了。 　　行动还不大灵便的积出院后，发现了一连串的怪事：他看到清深夜在大厅盯着电视，得知清的母亲并未过世而清竟一直隐瞒，发现屋中竟然装上了监视器。甚至，连清的前度男友的意外死亡，也似乎与清有关。而这套新房的上一手业主，就是清本人。 　　妹妹September（应采儿 饰）从国外回来，她一直陪伴着积，帮他理清事情真相，活泼开朗的性格让积的生活有了些阳光。然而，事情的真相却如此残忍。

积（陈奕迅 饰）和清（谷祖琳 饰）搬进了一间新房，开始了甜蜜的二人世界。他们感情很好，清是中学老师，而积则撰写色情光盘的简介。新屋入住的第一个深夜，积就在外面遇上了车祸。他昏迷过去，之后的一切，都因为这场车祸彻底的改变了。 　　行动还不大灵便的积出院后，发现了一连串的怪事：他看到清深夜在大厅盯着电视，得知清的母亲并未过世而清竟一直隐瞒，发现屋中竟然装上了监视器。甚至，连清的前度男友的意外死亡，也似乎与清有关。而这套新房的上一手业主，就是清本人。 　　妹妹September（应采儿 饰）从国外回来，她一直陪伴着积，帮他理清事情真相，活泼开朗的性格让积的生活有了些阳光。然而，事情的真相却如此残忍。

15年前的一桩交通事故，令一个男人（黄秋生 饰）死于车底。他的头被卡在车身地下，身体却走了一段路后才倒下。这个恐怖的场面，被一个小女孩看到了，吓得目瞪口呆。 　　15年后，发型师Peter（陈奕迅 饰）和June（舒淇 饰）一夜情，却令Peter真的爱上了June。June是一个神秘的女孩，自称阴阳眼可以见到鬼。自从二人交往以来，怪事连连发生，Peter目睹了件件怪事，灵异的现象让他非常苦恼。最后他怀疑眼前的June，并发现她与身着道袍的人碰头。当June提醒他，有无头鬼要索他的命，Peter也只当她胡言乱语，一气之下与她分手。 　　然而June说得没错，一切的灵异诡秘，都来源于15年前的那场车祸。

15年前的一桩交通事故，令一个男人（黄秋生 饰）死于车底。他的头被卡在车身地下，身体却走了一段路后才倒下。这个恐怖的场面，被一个小女孩看到了，吓得目瞪口呆。 　　15年后，发型师Peter（陈奕迅 饰）和June（舒淇 饰）一夜情，却令Peter真的爱上了June。June是一个神秘的女孩，自称阴阳眼可以见到鬼。自从二人交往以来，怪事连连发生，Peter目睹了件件怪事，灵异的现象让他非常苦恼。最后他怀疑眼前的June，并发现她与身着道袍的人碰头。当June提醒他，有无头鬼要索他的命，Peter也只当她胡言乱语，一气之下与她分手。 　　然而June说得没错，一切的灵异诡秘，都来源于15年前的那场车祸。

陈静宜（周海媚 饰）是一名高级督察，母亲在20年前被变态凶徒残忍奸杀了，成为警察的她务求能找到凶手。此时，相同手法的杀人案件出现了，静仪内心再起波澜以外，极力追寻真凶。众多追求者的静仪，与同是警察的有妇之夫发展了一段暧昧关系。但她并没有忘了要将凶徒绳之于法。但在她不断追捕的过程中，渐渐落入了凶手的圈套了……

陈静宜（周海媚 饰）是一名高级督察，母亲在20年前被变态凶徒残忍奸杀了，成为警察的她务求能找到凶手。此时，相同手法的杀人案件出现了，静仪内心再起波澜以外，极力追寻真凶。众多追求者的静仪，与同是警察的有妇之夫发展了一段暧昧关系。但她并没有忘了要将凶徒绳之于法。但在她不断追捕的过程中，渐渐落入了凶手的圈套了……

香港出租车夜晚拉客常常遇鬼，比如夜车司机林中发（古天乐饰）就差点载一女鬼（罗兰饰）前往荃湾，而同事“快车长”（雷宇杨饰）却遇见某女扮鬼诈骗，随后又载真女鬼前往和合石火葬场。嗜赌成性的林中发收工后被追债上门，为躲赌债不得已携妻子（李蕙敏饰）和儿子安仔搬入阴阳路上某廉价大屋，却发现房中闹鬼，吓得安仔夜夜哭泣不停。林中发向屋中鬼魂（吴毅将饰）赌咒发誓，若帮他畅通财路，便愿将自己所有一切分半同享。第二日，林中发发现屋中出现一组神秘数字，从此他所向披靡，逢赌必胜；但林中发没想到的是，屋中鬼魂要分的不仅是他的财富，还有他的妻子和儿子…… 　　本片是《阴阳路》系列的第五部作品。